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2019/2/12 15:38:21
~RNA pulldown技術是從RNA出發研究RNA與蛋白及RNA相互作用的關鍵技術。利用pulldown技術可以高效的富集與目的RNA相互作用的蛋白或者RNA。RNA pulldown結合高分辨質譜可以鑒定與目的RNA相互作用的未知蛋白,探索RNA結合蛋白質組;通過高通量測序可以鑒定與目的RNA相互作用的未知RNA。同時可以通過免疫印?;蛘逺T-PCR鑒定已知的相互作用。RNA pulldown是研究RNA與蛋白、RNA相互作用,探索RNA生物學功能的必備技術。
RNA pulldown主要是基于“生物素-鏈霉親和素”相互作用的原理建立的實驗技術,分RNA直接標記法和探針法,應用于不同的實驗要求。RNA直接標記法需首先將RNA基因克隆在T7啟動子下游,并借助T7 RNA聚合酶體外轉錄出目的RNA。隨后對RNA進行末端生物素標記,并用鏈霉親和素磁珠去拉與RNA結合的蛋白或者RNA。此方法主要應用于線性RNA。探針法則是根據目的RNA序列特點及空間構象,設計合適DNA或者RNA反義探針并標記生物素,利用堿基互補配對原則富集目的RNA并將RNA結合的蛋白、RNA一并拉出來。此法主要應用于環狀RNA或者多轉錄本線性RNA合并pulldown分析。
本試劑盒是專門為探針法設計的RNA pulldown試劑盒。試劑盒包含了pulldown及RNA富集所需試劑,可以有效的富集目的環狀RNA或者線性RNA以及與其相互作用的蛋白和RNA。富集產物可以純化蛋白,也可以純化RNA供下游分析。
 
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